NY/T 3146—2017 动物尿液中22种卩-受体激动剂的测定 液相色谱-串联质谱法[高清PDF]

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(*注：以下内容并未完全按照原文进行排版，且信息并不完全，也未经过严格校对，所以仅供参考！建议【不要直接作为从业依据】！具体信息还请阅读标准原文PDF。)

1范围

本标准规定了动物尿液中22种B-受体激动剂含量测定的液相色谱-串联质谱方法。

本标准适用于猪尿液、牛尿液和羊尿液中克仑特罗(Clenbuterol)、沙丁胺醇(Salbutamol)、莱克多

巴胺(Ractopamine)、齐帕特罗(Zilpaterol^^^^^^^^^^^^aline)、特布他林(Terbutaline)、西马特

、马布特罗(Mabuterol 特罗(Brombuterol)、班布特罗 ,。1)、利托君*itodrine)、沙美特罗(Salme- rmoteroD、苯乙醇胺 A(Phenyle- 贝特 ^^Labetalol)22 种片受

用攵件，仪”日囲用于本文

-串联质谱

罗(Cimaterol)、西布特罗(Cimbuten (Bambuterol)、克仑普罗(Clen四jperol)、妥布

.定恤为0.2

terol)、喷布特罗(Penbuter马 thanolamine A)、异克舒冬(Isoxw 体激动剂的测定。

本标准方法检t

下列文件对ir 件。凡是不注I

GB/T 66I

仪件的成用是必 引用文件,其最亲 、析实验室用水规

括所;

£方法

3原理

尿液样品卷， 仪检测，内标法定』

捆萃

吹干、稀释液

4.1

4.2

4.3

4.4

4.5

4.6

4.7

除非另有剂均

甲醇:色谱

甲酸:色谱级

乙腊:色谱纯i

试样稀释液:取

氨水甲醇溶液:取5 mb氨9

高氯酸溶液:取30 mL次酸丄迫mLE合。

0. 2 mol/ L乙酸铉提取液

用水符合

喩并稀释至1 000 mL,用冰乙酸调

pH 至 5.2。

4. 8氢氧化钠溶液:称取氢氧化钠10 g,溶于100 mL水中。

4. 9 (3 一葡萄糖昔酸酶/芳基硫酸酯酶，活性285 000 U/mL0

4. 10 B-受体激动剂对照品(克仑特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、齐帕特罗、氯丙那林、特布他林、西马特 罗、西布特罗、马布特罗、漠布特罗、班布特罗、克仑普罗、妥布特罗、利托君、沙美特罗、喷布特罗、马喷特 罗、福莫特罗、苯乙醇胺A、异克舒令、克伦塞罗、拉贝特罗)邙-受体激动剂内标对照品(氯丙那林-D7、 西马特罗-D7、西布特罗-D9、沙丁胺醇-D3、马布特罗-D9、克仑普罗-D7、莱克多巴胺-D3、克仑特罗- D9、苯乙醇胺A - D3、沙美特罗-D3):纯度297%。

12受体激动剂标准工作液:分别吸取各种受体激动剂标准储备液(4・1。)，用0.2%甲酸水溶液

(4. 3)稀释成浓度为1 fzg/mL的标准工作液。2°C〜8°C冷藏保存,有效期3个月。

13 8-受体激动剂内标储备液:精密称取各种8-受体激动剂内标对照品至棕色容量瓶中，用甲醇 (4. 1)配成浓度各为1 mg/mL的标准储备液,2°C〜8笆冷藏保存,有效期12个月。

4. 14受体激动剂内标工作液:分别吸取各种受体激动剂内标储备液，用°・2%甲酸水溶液(4. 3)

稀释成浓度为1 Mg/mL的标准工作液。2°C~8°C冷藏保存,有效期3个月。

4. 15氮气:纯度99.9%。

4. 16固相萃取小柱:混合型阳离子交换柱(3 mL,60 mg),或其他性能类似的小柱。

17滤膜：0.22/m,有机系。

5仪器和设备

1液相色谱串联质谱仪:配有电喷雾电离源。

5.2氮吹仪或旋转蒸发仪。

3离心机:转速不低于8 000 r/ mino

5.4涡旋振荡器。

5.5恒温水浴摇床。

5.6固相萃取装置。

5.7 天平:感量 0.000 01 go

6试样的保存

样品应置于一18笆保存，测试有效期不超过3个月，分析前放置至室温，如有浑浊，离心后取上清液 备用。

7分析步骤

7. 1酶解

精确吸取试样10 mL于50 mL离心管中,用高氯酸溶液(4. 6)或氢氧化钠溶液(4. 8)调节试样pH 至5~7之间。准确加入10 mL乙酸俊溶液(4. 7).50 ML(3-葡萄糖昔酸酶/芳基硫酸酯酶和10 内标 工作液(4. 14)o涡旋混合30 s,于37笆振荡水解过夜(应大于16 h)，加入1. 0 mL高氯酸溶液(4. 6),涡 旋混合30 s,然后于8 000 r/min离心5 min,上清液备用。

7.2净化

固相萃取小柱依次用3 mL甲醇、3 mL水活化。取适量或全部上清液过柱，用3 mL水和3 mL甲 醇淋洗，抽干，用3mL氨水甲醇溶液(4. 5)洗脱,收集洗脱液。洗脱液用氮吹仪在50°C条件下吹干，用 1. 0 mL样品稀释液(4. 4)溶解，过0. 22 滤膜。如检测含量超出线性范围(1. 0淄/L〜100昭/L)，应 适当减少过固相萃取小柱的溶液量，将上机溶液所含药物的浓度稀释至线性范围(1.0 pg/L〜100昭/ L)内上样。

7.3参考液相色谱条件

色谱柱:CM柱，柱长150 mm,内径3. 0 mm,粒径1. 7 pm(或其他效果等同的C”柱)。

柱温：30°Co

流动相及参考梯度洗脱程序见表1。

表1流动相及参考梯度洗脱程序

时间,min

流速,mL/ min

0.1%甲酸溶液，％

乙睛，％

0

0.3

95

5

1.0

0.3

95

5

2.0

0.3

80

20

6.0

0.3

70

30

7.0

0.3

10

90

8.0

0. 3

10

90

9. 1

0. 3

95

5

10

0.3

95

5

7.4参考质谱条件

离子源：电喷雾离子源。

扫描方式:正离子模式。

检测方式:多反应监测。

脱溶剂气、锥孔气、碰撞气均为高纯氮气及其他合适气体，使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏 度达到检测要求。

毛细管电压、锥孔电压、碰撞能量等电压值应优化至最佳灵敏度。

定性离子对、定量离子对及对应的锥孔电压和碰撞能量见表2。

表2 22种0-受体激动剂及内标的定性离子对、定量离子对及锥孔电压、碰撞能量的参考值

被测物名称

定性离子对,m/ z

定量离子对,m/ Z

锥孔电压,V

碰撞能量,eV

氯丙那林

213. 9>153.9

213. 9>153. 9

26

32

213. 9>90. 9

16

西马特罗

220. l>202.1

220. l>202.1

23

16

220.1>160. 0

10

特布他林

226. 0>152. 0

226. 0>152. 0

25

20

226. 0> 170.0

20

妥布特罗

228. 0>154. 0

228. 0> 154.0

26

20

228. 0>172.0

20

西布特罗

234. 0>160. 0

234. O>216. 0

25

15

234. 0>216.0

9

沙丁胺醇

240. 0>148.0

240. 0>148. 0

25

20

240. 0>222. 0

10

齐帕特罗

262. 2>185.0

262. 2>185. 0

24

24

262. 2>244. 0

13

克仑普罗

263. l>203.1

263. l>203.1

22

18

263.1>245. 2

11

克仑特罗

277. 0>203. 0

277. 0>203. 0

25

20

277. 0>259. 0

10

利托君

288. 0>150. 0

288. 0>150

19

20

288. 0>121. 2

20

喷布特罗

292. 2>236. 2

292. 2>236. 2

22

20

292. 2>209. 2

15

异克舒令

302. 0>150. 0

302. 0>150

22

20

302. 0>107. 0

20

莱克多巴胺

302. 2>163. 9

302. 2>163. 9

20

16

302. 2>284. 2

12

（以上是摘录部分标准内容，更多信息还请参考原文PDF）

网盘链接

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