SC/T 2077—2017 漠斑牙鲜[高清PDF]

标准简介

标准截图

标准文档说明

标准部分原文

(*注：以下内容并未完全按照原文进行排版，且信息并不完全，也未经过严格校对，所以仅供参考！建议【不要直接作为从业依据】！具体信息还请阅读标准原文PDF。)

1范围

本标准给出了漠斑牙^-^Paralichthys lethostigma (Jordan & Gilbert, 1884)］的学名与分类、主要 形态特征、生长与繁殖、细胞遗传学特征、分子遗传学特征、检测方法及判定规则。

本标准适用于漠斑牙鲜种质鉴定和检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T 18654.2养殖鱼类种质检验 第2部分:抽样方法

GB/T 18654.3养殖鱼类种质检验 第3部分:性状测定

GB/T 18654. 12养殖鱼类种质检验 第12部分:染色体组型分析

3学名与分类

1学名

漠斑牙Paralichthys lethostigma (Jordan & Gilbert, 1884) 0

3.2分类地位

硬骨鱼纲(Osteichthyes)，鳏形目(Pleuronectiformes)，牙鲜科(Paralichthyidae)，牙鲜属(Paralichthys') o

4主要形态特征

1外部形态

漠斑牙鲜体形呈扁平、卵圆形,两眼位于头部左侧。变态前双眼分别位于身体两侧，随着仔稚鱼生 长，右侧的眼睛逐渐移向左侧。变态完成后,开始营底栖生活,无眼侧(体右侧,腹部)贴底,有眼侧(左 侧,背部)朝上。漠斑牙鲜有眼侧呈浅褐色，体表颜色明暗相间，并混合着一些不规则的棕褐色斑点，无 眼侧为乳白色。体腔小，无縹。漠斑牙鲜外观形态见图lo

/

图1漠斑牙鲜外形

4.2可数性状

4. 2.3 脊椎骨36个〜38个。

4.3可量性状

可量性状比值见表1。

5.2繁殖

性成熟 1 000 g。雌・ 鱼怀卵量可: mm〜1.05 I

g eA A* m ■遅■ ♦

图2漠斑牙鲜染色体核型图

7分子遗传学特征

对线粒体16 S rRNA基因片段进行扩增和测序，获得长度为633 bp核昔酸序列，种内个体间遗传 距离小于2%,核昔酸序列如下：

1CGCCTGTTTTACCAAAAACATCGCCTCTTGCAAAACATAAGTATAAGAGGTCCCGCCTGC60

61CCAGTGACAAGATAGTTTAACGGCCGCGGTATTTTGACCGTGCAAAGGTAGCGTAATCAC120

121TTGTCTTTTAAATGAAGACCCGTATGAATGGCATAACGAGGGCTTAACTGTCTCCTTCCC180

181CCAGTCAATGAAATTGATCTCCCCGTGCAGAAGCGGGGATAAAATCATAAGACGAGAAGA240

241CCCTATGGAGCTTTAGACGCAAAGACAGATCATGTCAAATACACCTAGTTATAGGCCTGA300

301ACTAAATGAAACCAGTCTTGATGTCTTCGGTTGGGGCGACCATGGGGAACACAAAACCCC360

361CACGTGGAACAGGAGTACACCCCTATCTTTCCCACCTCCTACAAACTAGAGCAACAGCTC420

421TAATAAGCAGAAATTCTGACCAAACTGATCCGGCAACGCCGATCAACGAATCAAGTTACC480

481CTAGGGATAACAGCGCAATCCCCTTTTAGAGCCCATATCGACAAGGGGGTTTACGACCTC540

541GATGTTGGATCAGGACATCCTAATGGTGCAGCCGCTATTAAGGGTTCGTTTGTTCAACGA600

601TTAAAGTCCTACGTGATCTGAGTTCAGACCGGA633

8检测方法

8. 1抽样方法

按GB/T 18654. 2的规定执行。

8.2形态性状测量

按GB/T 18654. 3的规定执行。

8.3染色体检测

染色体的制备、计数与核型分析按GB/T 18654. 12的规定执行。

8.4线粒体16SrRNA基因片段的扩增

8. 4. 1 DNA 提取

每个个体取约100 mg肌肉，剪碎组织，加入475 ML组织匀浆缓冲液(10 mmol/L Tris - HCl,pH = 8.0；50 mmol/L EDTA,pH=8. 0),充分混匀，依次加入终浓度为10%的SDS和20 Mg/mL的蛋白酶

K,55°C裂解至澄清，用酚、酚：氯仿(1 : 1)和氯仿各抽提1次。DNA用1 %琼脂糖凝胶电泳检测，全自 动凝胶成像系统拍照，一20笆保存备用。

8. 4. 2 PCR 扩增

引物：16S AR：5'- CGCCTGTTTACCAAAAACAT- 3',16S BR：5‘- CCGGTCTAGACTCAGAT- CACGT-3'。

PCR反应条件：94°C预变性5 min,94°C变性30 s,56°C退火30 s,72°C延伸1 min,30个循环；72°C延 伸 5 mino PCR 反应总体积体系为 25 piL, 10XPCR buffer 2. 5 /iL,dNTPs 0. 2 mmol/L,MgCl2 2 mmol/

Taq 酶 1 Uo 弓I物各 0. 12 fzmol/L,模板 DNA 50 ng〜100 ngo

PCR扩增产物经1.0%琼脂糖凝胶检测，电泳缓冲液为lXTBE(pH 8.0),电压为4 V/ cm, Genefinder染色，于凝胶成像系统下观察并拍照记录。

8.4.3 DNA序列测定

将PCR产物纯化后双向测序。

9判定规则

检测结果不符合第4章、第6章中任意一条要求的，则判定为不合格项;有不合格项的样品为不合 格样品。

（以上是摘录部分标准内容，更多信息还请参考原文PDF）

网盘链接

百度网盘：https://pan.baidu.com/s/1ttQuaB_m6RINZUpXef2Cbg
提取码：gspa