渔药毒性试验方法 第1部分:外用渔药急性毒性试验 渔药毒性试验方法 第1部分:外用渔药急性毒性试验[高清PDF]

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标准部分原文

(*注：以下内容并未完全按照原文进行排版，且信息并不完全，也未经过严格校对，所以仅供参考！建议【不要直接作为从业依据】！具体信息还请阅读标准原文PDF。)

第1部分:外用渔药急性毒性试验；

第2部分:外用渔药慢性毒性试验。

本部分为SC/T 1087的第1部分。

本部分的附录A、B为规范性附录，附录C、D为资料性附录。

本部分由中华人民共和国农业部提出。

本部分由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口 O 本部分起草单位:上海水产大学、农业部渔业动植物病原库。 本部分主要起草人:杨先乐、杨勇。

渔药毒性试验方法第1部分:外用渔药急性毒性试验

1范围

本部分规定了外用渔药对试验水生动物急性毒性试验的方法。

本部分适用于外用渔药急性毒性试验。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本部分。

GB/T 13267-1991水质 物质对淡水鱼（斑马鱼）急性毒性测定方法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1

渔药 fishery drugs

本标准所指的渔药是指用以预防、控制和治疗水产动植物的病、虫、害，促进养殖品种健康生长，增 强机体抗病能力以及改善养殖水体质量的一切物质。

3.2

急性毒性试验 acute toxicity test

高浓度或较高浓度的被测试渔药,引起试验水生动物群体在短时间内产生一定有害作用的试验。

3.3

静水式试验static test

试验期间不需更换试验液,限于研究那些化学性质比较稳定的渔药。

3.4

换水式试验semi-static test

每24 h或更短的时间更新一次试验液。

3.5

半数致死浓度 median lethal concentration

在确定的试验条件和规定的时间内（如24 h、48 h或96 h）,试验水生动物在待测试渔药的作用下, 导致其半数死亡的该渔药的浓度。这个浓度常以某个时间（如24 h、48 h或96 h）的LC5Q（半数致死浓 度）表示。

Hi

4.1试验水生动物

试验前试验对象要在与试验时相同的环境条件下至少驯养2周，期间死亡率不得超过10%,否则 该批试验动物不得用作试验。

驯养期间不得用任何药物。试验前24 h停止投饲,每天清除粪便及食物残渣。

剑尾鱼和斑马鱼驯养与繁殖的环境参数参见附录C.Do

4.2标准稀释水、渔药储备液和试验溶液

4.2.1标准稀释水

4.1.2.1标准稀释水的制备

用蒸馅水分别制备92 mmol/L浓度的氯化钙、27 mmol/L浓度的硫酸镁、35 mmol/L浓度的碳酸氢 钠和3 mmol/L浓度的氯化钾等四种溶液（附录B）,然后取以上4种溶液各25 mL混合并稀释至1 L,充 分曝气至溶解氧浓度达到空气饱和值，即为标准稀释水。它用于配制渔药储备液和试验溶液。

4.1.2.2标准稀释水水质基本要求

新配置的标准稀释水pH应为7.8±0.2,硬度为250mg/L左右（以CaCQ计）。在酸碱度达不到 所规定要求时，可用氢氧化钠溶液或盐酸调节pHo

4.2.2渔药储备液

将已知量的渔药（以有效成分计）溶于一定体积的标准稀释水中，即为渔药储备液。该储备液作为 配制试验溶液的母液供当天使用。对于化学性质较稳定的渔药，配制的储备液在4 I保存可供2 d使 用。对溶解度低的渔药，在溶解时可使用超声波装置促使溶解,或加入对试验没有影响的有机溶剂，但 有机溶剂在试验溶液中的浓度不应超过0.lmg/Lo

4.2.3试验溶液

将适量的渔药储备液加入标准稀释水中，使其达到所需要的浓度，即为试验溶液。

4.3仪器设备

4.3.1试验容器

试验容器应为玻璃或其他化学惰性物质制成的无明显吸附试验渔药的容器,并保证有足够大的容 积,试验介质与空气间有足够大的界面（每10 L水要有大约800 cm2的界面积），并备有牢固的密封盖。

初次使用的试验容器应仔细清洗。试验后，倒空容器，清洗掉残留渔药,干燥后备用。

4.3.2控温设备

控温装置应满足将试验溶液和试验容器中的水温调节至试验设定温度。

4.3.3抄网

抄网用尼龙纱绢或纱布制成，做到专网专用。

4.4环境条件

试验液中溶解氧浓度不低于5 mg/L；每天光照保持12 h〜16 h;避免强光直射;试验期间水温恒定 于设定的温度;试验过程中尽量避免外界干扰。试验溶液的配制与储存、试验水生动物的管理及全部试 验都应在空气污染物未达到有害浓度的环境下进行。

选择重铭酸钾（KzSOz）作为参考毒物,24 h重铭酸钾的LC50值应处于200 mg/L〜400 mg/L。可 根据需要进行多次参考毒物的毒性试验，以得到参考毒物试验数据重现性的资料，每当蓄养种群发生变 化都应按本方法规定的条件重复进行试验。

4.5试验步骤

4.5.1预备试验

预备试验用于确定试验浓度的范围。预备试验浓度梯度一般以10为公比作间隔。

在6个容器中加入适量标准稀释水，其中5个容器中随机加入适量的渔药储备液，配制一组适宜的 浓度系列，第6个容器用作对照,每个容器放试验水生动物5尾（只）。如果数据不充分,无法确定正式

试验所需要的浓度范围，则另选一组浓度范围重新进行试验。

在试验所要求的温度下进行试验，试验时间为24 h〜26 ho每天定时测定2次容器中的溶解氧浓 度,发现试验水生动物死亡及时处理。

4.5.2正式试验

4.5.2.1确定试验方式

根据被测试渔药的性质确定釆用静水式或换水式试验。

4.5.2.2试验浓度和试验分组

试验浓度确定在试验水生动物全部死亡的最低浓度与全部不死亡的最高浓度间，按预备试验确定 的浓度范围以几何级数做间距，选择6个浓度进行正式试验，并设平行，其中包括一个不含试验渔药的 试验溶液的对照（如果用有机溶剂溶解试验渔药，则需要加设一个含有有机溶剂的对照,其有机溶剂的 浓度与试验溶液中有机溶剂的最高浓度相同）。所选择的试验溶液的浓度应包括能够测得试验水生动 物20%到80%死亡率的浓度。

4.5.2.3试验操作

从驯养试验水生动物群体中随机、迅速取10尾（只）或10尾（只）以上的试验水生动物放入各试验 容器中。在操作过程中因转移处理错误的试验水生动物弃去不用。全部操作过程要在30 min内结束。

换水式试验每8h~24h更换一次试验液。试验水生动物转移时应从最低浓度到高浓度，避免造成 试验渔药的明显转移。

4.5.2.4试验观察和记录

观察并记录试验水生动物的平衡、游动、呼吸、体色变化等中毒症状和死亡情况，特别是试验开始后 3h〜6h内。以后每天至少记录2次并及时清出死亡动物。每天定时测定2次试验液的溶解氧、pH和 温度，试验开始和结束时还应测定各组试验液中渔药的浓度，记录表格见附录Ao

5结果的表述

5.1死亡率的修正

试验要求对照组的死亡率不得超过10% （最好低于5%）,否则试验要重新进行。当对照组中试验 水生动物出现偶尔死亡时,各浓度组的死亡率按（1）式加以修正。

p=Y^xioo（1）

式中：

P ——校正后的死亡百分数，%;

pt——试验组死亡百分数,％;

C——对照组死亡百分数，％。

5.2 LA。计算

按GB/T 13267-1991中第8章规定的三种方法之一计算24 h、48 h、72 h和96 h的LC50值。结果 常以48 hLC50或96 hLCso表示。

5.3试验报告

试验报告中要求包括下列资料及数据:

a）试验方式、试验水温及试验水质基本情况。

b）试验水生动物的详细情况。

c）配制稀释水、储备液和试验液的方法。

d）试验水生动物的中毒症状，试验和对照组中试验水生动物的死亡率及其反应异常率。

e）LC50计算方法以及24 h、48 h、72 h和96 h的LCso值（在可能情况下列出其95%置信限）。

（以上是摘录部分标准内容，更多信息还请参考原文PDF）

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