NY/T 3089—2017 化学农药青錯一代繁殖延长试验准则[高清PDF]

标准简介

标准截图

标准文档说明

标准部分原文

(*注：以下内容并未完全按照原文进行排版，且信息并不完全，也未经过严格校对，所以仅供参考！建议【不要直接作为从业依据】！具体信息还请阅读标准原文PDF。)

化学农药青錯一代繁殖延长试验准则

1范围

本标准规定了化学农药对青嶙一代繁殖延长试验的材料、条件、质量控制、试验报告的基本要求。

本标准适用于测试和评价化学农药變芝验，其他类型的农药可参照使用。 本标准不适用于易挥发和难溶螂勺化学农药：

稀释液、储备液和试验溶液

稀释液和储备液是指流水式试验系统中所用的试验用水和高浓度供试物溶液；试验溶液指用于暴 露的各浓度处理的供试物溶液。

4试验概述

根据供试物对鱼的毒性与代谢行为设置5组试验浓度。将性成熟的日本青^Oryzias latipes^. 代雌鱼和雄鱼配对暴露于试验溶液3周。在第4周的第1 d或第1 d〜第2 d收集鱼卵作为F,代继续暴 露。在F,代暴露期间（共15周）评估孵化率和存活率。F.代孵化后9周〜10周采集亚成鱼样本进行 发育端点评估，12周〜14周评估繁殖力。评估繁殖力3周后开始培育F2代，F2代全部孵化后结束 试验。

5试验方法

5. 1材料和条件

5. 1. 1供试生物

5. 1. 1. 1供试生物及饲养

供试生物为日本青^Oryziaslatipes^饲养光照周期光暗比为16 h ： 8 h。日本青婿的饲养方式 不设定特定要求。

5. 1. 1.2受试鱼的驯化

5. 1. 1. 2. 1受试鱼应来自同一个实验室的相同品系，在与试验环境相似的条件下驯化至少2周.该驯 养期不能作为预暴露期。受试鱼宜来自本实验室。试验至少需要雌雄42对鱼来保证足够的重复，当有 溶剂对照时要用54对。应检测Fo代繁殖对的性别基因，验证其是XX-XY基因型.避免使用XX基因 型的假雄鱼。

5. 1- 1.2.2 48 h的稳定期后，记录驯养鱼群的死亡数，并按照以下要求操作：

a）试验前7 d内鱼群的死亡率V5%,该批鱼可用于试验；

b）试验前7 d内鱼群的死亡率在5%〜10%之间,再驯化7 d达到14 d的驯化期;第二个7d内死 亡率N5%,整批鱼不应用于试验，第二个7d内死亡率V5%,该批鱼可用于试验；

c）试验前7 d内鱼群的死亡率21。％，整批鱼不应用于试验。

5. 1. 1.2. 3驯化期和暴露期间不应对受试鱼进行疾病防治，有疾病症状的鱼不可用于试验。驯化前的 饲养期间，应记录疾病的预防、治疗过程及结果。

5. 1. 1.3受试鱼的选用

选择同一批驯化的、鱼龄（自受精卵）212周、性别差异明显且遗传稳定的成年鱼。试验前1周，应 确认试验成鱼具有活跃的繁殖能力。所有用于试验的鱼按性别分类，同性别受试鱼的体重应该保持在 算数平均值的±20%范围内。在试验前应抽样测量受试鱼的平均体重。雌鱼体重应三300 mg.雄鱼体 重应2250 mg0

5. 1. 1.4 饲喂

可以喂食虫龄为24 h的卤虫（Artemia spp.）幼虫，品种不限。也可补充喂食市售饲料。市售饲料 应定期检测污染物含量。应避免使用具有内分泌干扰活性的食物（如植物雌激素）。未吃掉的食物及排 泄物按规定清除，如用虹吸法小心清洁每个容樱。容器边缘和底部每周清洗1次〜2次，可用刮刀刮 除。各时期食物饲喂量参见附录A。

5.1.2供试物

供试物应使用农药纯品或原药。不推荐使用助溶剂，如果使用需说明使用理由。难溶于水的原药 可用少量对鱼类毒性小的有机溶剂、乳化剂或分散剂等助溶。已知可用的助溶剂包括:二甲基亚砚、三 甘醇、甲醇、丙酮、乙醇等。当供试物使用有机溶剂助溶时，应尽可能降低助溶剂浓度.试验药液中助溶 剂的浓度不应超过100 >L（mg）/L,并应以助溶剂最大浓度设置溶剂对照组。

5. 1.3主要仪器设备

一溶解氧测量仪；

—pH测量仪;

水硬度计；

——酸碱度测定仪；

恒温室或恒温箱，自动温度监测仪；

一电子天平。

5.1.4试验用水

试验用水应适合受试鱼长期存活和生长。试验期间应保持水质恒定，定期取样分析,避免水质变化 影响试验生物和试验结果。测定包括重金属（如Cu、Pb、Zn、Hg、Cd、Ni）、主要阴离子（如cr .SOD和 阳离子（如Ca2+、Mg2「、Na+、K,）、其他农药、总有机碳和固体悬浮物的含量等。如确定试验用水的水 质相对稳定，可每6个月测定一次。试验用水的化学特性见附录Bo

5.2试验操作

5. 2. 1暴露方法的选择

一般不限定暴露系统的设计和材料。根据本试验的原理，可用玻璃、不锈钢或其他化学惰性材料构 建流水式试验系统,试验系统应在试验前未受到污染。

通过合适的泵将供试物储备液循环分配至试验系统中。暴露前检测试验溶液的浓度并校正储备液 的流速，试验期间还需检查溶液更换周期。同时,应根据供试物的化学稳定性和水质，确定试验溶液的 更新频率，每天更新5倍〜16倍试验体积，或流速大于20 mL/min。

5.2.2试验设计

5. 2. 2. 1试验浓度

应设置不少于5个供试物浓度处理组，另设空白对照组。如果使用助溶剂，需同时设置空白对照组 和溶剂对照组。试验浓度范围可参考现有的资料信息，如相似物的信息、已有的鱼类毒性试验结果，按 照GB/T 31270. 12.GB/T 21806和OECD TG 229等鱼类毒性试验方法完成的试验数据，也可进行繁 殖期的预试验，以确定正式试验浓度范围。进行预试验时，试验条件（水质、试验系统、生物负荷量）应尽 可能与正式试验一致。通过预试验还可了解助溶剂的适用性。最高试验浓度不应超过供试物的水中溶 解度JOmg/L或96h-LG。的1/10；最低试验浓度应为最高试验浓度的1/100〜1/10,各浓度间级差 应＜3. 2。设置的5个试賤浓度应确保能够计算剂量-效应关系,并获得LOEC和NOEC。

5. 2. 2. 2试验重复

每试验浓度至少6个重复，对照组12个重复，当设溶剂对照组时，其重复数应与空白对照组相同。 试验重复设置方法参见附录C。H代繁殖期间所有处理重复数加倍。每重复为一对雌雄配对鱼。 5.2.3试验准备

试验前，将符合试验要求的配対鱼分别移入试验容器中，每试验容器为一个重复。

5.2.4试验暴露

5.2.4. 1暴露环境

试验环境条件和参数见附录D。试验结束时对照组的端点指标应达到附录E中所列指标要求。

试验期间，各处理组和空白对照组至少测定一个试验容器中的溶解氧、pH和温度。每天测定水 温，其他指标至少每周测定一次。

5. 2. 4. 2暴露时间

Fo代鱼暴露3周，在第4周，建立Fi代并将Fo代安乐死并移出，记录其休車和体长。F,代暴露15 周，F2代暴露2周至孵化。试验时间共19周。试验暴露时间参见附录F。

5. 2. 4. 3各暴露阶段

5. 2.4.3. 1第1周〜第3周（Fo）

F。代鱼暴露3周，使发育中的配子体和性腺组织暴露于供试物。每试验容器只培养一对繁殖对 （XX基因型雌鱼与XY基因型雄鱼各一尾）。从试验第1 d开始.连续21 d收集鱼卵.统计产卵数及受 精率。

5. 2. 4.3.2 第 4 周（Fo 和州）

（以上是摘录部分标准内容，更多信息还请参考原文PDF）

网盘链接

百度网盘：https://pan.baidu.com/s/1p1b5v5zuJQsjVQf4wQXLzA
提取码：upta