农业行业标准 西瓜抗枯萎病鉴定技术规程[高清PDF]

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标准部分原文

(*注：以下内容并未完全按照原文进行排版，且信息并不完全，也未经过严格校对，所以仅供参考！建议【不要直接作为从业依据】！具体信息还请阅读标准原文PDF。)

西瓜抗枯萎病鉴定技术规程

1范围

本标准规定了西瓜对枯萎病（参见附录A）的抗病性评价方法。

2规范性引用文件

NY/T 1857. 3

3术语和定义

NY/T 1857.

4原理

通过人工电

性水平。

材料与方茏

1材料 M

5. 1. 1病原菌*

尖泡镰抱閑叫

5. 1. 2品种］

抗病对照品系

获得。

5. 1.3培养基

马铃薯葡萄糖琼脂］

5.1.4其他材料

培养皿（直径大小为90 nSi）,2^mL %萩、试膂癞芥酒型 温培养箱、超净工作台、高压灭羸由漏出産墅凳監保鼻 验仪器。

5.2方法

5. 2. 1 PDA培养基制备

称取洗净去皮的马铃薯200 g,切成小块，加水1 000 mL煮沸0. 5 h,纱布过滤，加入琼脂粉15 g,加热 彻底溶化后,再加入葡萄糖15 g,搅拌均匀并溶解后,加自来水至总体积为1 000 mL,分装F250 mL三角 瓶,121°C 0. 1 MPa灭菌20 min,随后倒入90 mm培养皿备用。

5. 2.2 PDB培养液制备

PDA培养基（5. 2. 1）中不加入琼脂粉,其他成分都相同的培养基为PDB培养液。

5. 2.3麦粒沙培养基制备

5.2.4病原菌扩繁

取保存在一80°C的西瓜枯萎病菌（尖抱镰泡菌西瓜专化型1号生理小种），用PDA培养基28°C复苏2 d,待菌落长出后再转接到新的PDA培养基上生长，培养7 d〜10 d备用。

2. 5伤根接种法孑包子悬浮液的制备

取生长旺盛的西瓜枯萎病菌菌丝,接种于PDB液体培养基中，在28°C摇床里振荡培养7 d〜10 d后， 将振荡培养后的菌液用双层纱布过滤，去掉菌丝,滤液以3 000 r/min离心，去除上清液，用无菌水重悬， 用血球计数板统计病原菌弛子的数冃，调至抱子悬浮液浓度为每毫升IX IO。个抱子，现用现配。

5.2.6鉴定材料育苗

用47%春雷霉素-王铜可湿性粉剂按1 000倍加入55°C温水中浸种6 h,用干净的湿纱布包好，置于 28°C催芽，待种子胚根长至0. 5 cm、85%的种子露白后播种。播种时，将种子轻轻放入培养钵或育苗盘， 覆盖潮土 1 cm,温度控制在25°C~30°Co

5.2.7 土壤或基质接种法

采用PDA培养基繁殖病菌,再用麦粒沙培养基扩大培养，制备菌土，需要鉴定的品种直接播种于菌 土中，同时播种对照品种。

5.2.8伤根接种法

取3叶或4叶期生长状态一致、健壮的西瓜幼苗，用清水冲洗根部的土壤，在取苗和冲洗过程中会在 根部造成伤口，将冲洗干净带伤口的幼苗根部浸泡于浓度为每毫升1X10。个抱子的病原菌抱子悬浮液中 10 min〜15 min,处理后的瓜苗定植于育苗钵内。设清水伤根接种为对照。

5.2.9病原菌在麦粒沙培养基中扩繁

将在PDA上生长状态旺盛的西瓜枯萎病病原菌用直径0. 6 cm的打孔器打取菌饼。取10块菌饼均 匀地接种到麦粒沙培养基中,28°C培养，每隔2 d充分摇匀，培养10 d〜15 d。

2. 10菌土制备

土壤或基质采用121°C 0. 1 MPa灭菌2 ho将病原菌生长充分的麦粒沙培养基捣碎，按照2%的质量 比,与灭菌的土壤或基质充分混匀,制成土壤或基质菌土，分装至培养钵或育苗盘，现用现配。

6抗病性鉴定

1鉴定设计

每份待测材料重复3次，每次重夏选取生长健壮、长势一致的待测材料不少于20株幼苗，用于抗病性 鉴定。

2接种后幼苗培养条件

两种方法接种后的鉴定材料在温室生长，温度控制在25°C~30°C，正常水分管理。

7病害调查及抗病性分级

1病害调查

7. 1. 1调查时间

接种后第15 d开始调查，每隔5 d调查一次,直至感病对照品种发病率达80%止。

7. 1.2调查方法

记录待测西瓜品种的发病情况，健株数及总株数等记入西瓜抗枯萎病鉴定调查表,计算发病率。

7.2抗病性评价

7.2.1发病率计算

根据调査数据，记录西瓜枯萎病品种抗病性鉴定调查表（参见附录B）o

按式（1）计算。

I）——a

P ——发病率,单位为百分号(%)；

b总株数,单位为株；

a——健株数，单位为株。

7.2.2抗病性分级标准

枯萎病抗病性分级标准用发病率的高低评价。PV2O%为高抗(High Resistance. HR)；2O%W0V 50%为中抗(Middle Resistance, MR) ； 50%W/><80%为轻抗(Slight Resistance, SR);力 280%为感病 (Susceptible,S)。

7. 2.3鉴定有效性判别

感病对照材料PN80%,且抗病对照材料PV2O%,该批次抗枯萎病鉴定结果视为有效。

8鉴定记录

鉴定结果报告单需要出具鉴定单位、地点及时冋等，报告格式参见附录B。

（以上是摘录部分标准内容，更多信息还请参考原文PDF）

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