NY/T 3195—2018 热带作物种质资源抗病虫鉴定技术规程橡胶树棒抱霉落叶病[高清PDF]
标准简介
[NY/T 3195—2018]《热带作物种质资源抗病虫鉴定技术规程橡胶树棒抱霉落叶病》由#中华人民共和国农业部于2018-03-15发布,适用于中华人民共和国。标准截图

标准文档说明
标准文档类型为热带作物种质资源抗病虫鉴定技术规程橡胶树棒抱霉落叶病高清PDF版本(文字版),标准文档内可进行搜索,可以复制原文,可粘贴。标准部分原文
(*注:以下内容并未完全按照原文进行排版,且信息并不完全,也未经过严格校对,所以仅供参考!建议【不要直接作为从业依据】!具体信息还请阅读标准原文PDF。)
热带作物种质资源抗病虫鉴定技术规程橡胶树棒抱霉落叶病
1范围
本标准规定了橡胶树[Hewa brasiliensis (Willd. ex A. Juss. ) Muell. Arg.]棒抱霉落叶病抗病性评
价的术语和定义、病原菌分离鉴定及接种墜寧歯坚史抗病性评价、抗病性评价有效性判定和结 本标准适用于橡胶树棒标落叶病抗病祐晶系硫蚤"
2规范性引用文件
件W注丨丨規的版本适用于本文
1病原菌分离鉴定
从发病植株上选取有典见组薄泠O句叶病病原菌,通过单弛分离 法对分离物进行纯化,经致病宿恥后.警通过形态学墜空/"Trs系统发育学分析确定为多主 棒抱菌,再用多主棒抱毒素的cas2蟲亀s5业型特异引解确定菌株的毒素类型(参见附录B), 分别选择cas2亚型和cas5亚型的强致病力菌株用灭菌的超纯水保存备用。
4.2病原菌菌饼接种体制备
将保存的cas2亚型和cas5亚型多主棒抱病菌接种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基平板上(平板直径 9 cm),(28+l)°C恒温培养7 d,用打孔器取菌落外缘的菌饼(直径5. 0 mm)作为接种体,对照则取同样 大小的空白PDA培养基。
4.3多主棒抱粗毒素提取液制备
3. 1改良培养基
7H2O 0. 5 g,NaCl 0.1 g,CaCl2 ・ 2H2O 0. 13 g,酵母膏 1. 0 g,蒸僭水 1 000 mLo
3.2粗毒素提取液制备
从培养7d的cas2亚型和cas5亚型多主棒弛病原菌菌落边缘打取3个直径5 mm的菌饼,接种于 装有150 mL的改良Fries 3号培养液(培养液的配方见4. 3. 1)中,(25±1)°C恒温箱12 h光暗交替静置 培养12 do将培养的菌液先用2层无菌纱布过滤;滤液于室温5 000 r/min离心10 min;上清液先用 0. 45 Mm的针筒式微孔滤膜过滤器过滤;再用0. 22 Mm针筒式微孔滤膜过滤器过滤,最后一次滤液即为 多主棒弛粗毒素提取液。制备好的粗毒素提取液于4°C冰箱保存备用。
5抗病性鉴定
1病原菌菌饼接种鉴定
1. 1鉴定设计
鉴定时设“IAN873”为抗病对照品系,“ PR107”为感病对照品系。
每个品系选取5片无病斑、完整的橡胶树淡绿期小叶,每片小叶作为1个重复,每个重复设4个接 种点,其中1个接种点为空白对照。
1.2接种
用无菌的牙签在接种点处轻轻刺伤,将病原菌菌饼有菌丝的一面贴于叶片接种点的伤口处,对照则 用空白PDA培养基贴于伤口处,用无菌的滤纸片蘸无菌水贴于菌饼上,叶片按品系贴好标签,置于 (28±1)°C保湿培养。24 h后去除菌饼,继续保湿培养。
5. 1.3数据统计
接种处理3d后进行调查。采用十字交叉法量取发病叶片病斑的直径,单位为厘米(cm),计算每张 小叶和品系平均值。
5.2粗毒素生物萎蔦法鉴定
5. 2. 1鉴定设计
鉴定时设“IAN873”为抗病对照品系,“ PR107”为感病对照品系。
每个品系选取12片橡胶树淡绿期小叶,每2片小叶作为1个重复,其中4个重复用于粗毒素处理, 2个用空白培养基处理做对照。
5.2.2接种
用消毒的手术剪刀将选取叶片的叶柄去除,称重后,迅速转移到含有20 mL粗毒素的50 mL离心 管中,以空白改良Fries 3号培养基作为对照。叶柄端朝下插入粗毒素提取液中,处理的橡胶树叶片置 于(25±1)°C的恒温箱中12 h光暗交替培养。
5. 2.3数据统计
接种处理3d后进行调査。
处理后的叶片用干净的吸水纸吸去叶片表面的液体,称取处理后每张橡胶树叶片的质量,根据处理 后与处理前叶片质量的比值来计算水分损失。
利用式(1)计算处理后的萎薦指数。
WI = Rl ~R, X 100 (1)
式中:
WI——萎蔦指数;
R ——对照叶片处理后与处理前的质量比值;
R ——处理叶片处理后与处理前的质量比值。
(以上是摘录部分标准内容,更多信息还请参考原文PDF)
网盘链接
百度网盘:https://pan.baidu.com/s/1xjV3nxUwarP0BiQehxLY2Q
提取码:5ehf
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