NY/T 3195—2018 热带作物种质资源抗病虫鉴定技术规程橡胶树棒抱霉落叶病[高清PDF]

标准简介

[NY/T 3195—2018]《热带作物种质资源抗病虫鉴定技术规程橡胶树棒抱霉落叶病》由#中华人民共和国农业部于2018-03-15发布,适用于中华人民共和国。

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热带作物种质资源抗病虫鉴定技术规程橡胶树棒抱霉落叶病
热带作物种质资源抗病虫鉴定技术规程橡胶树棒抱霉落叶病(截图)

 

标准文档说明

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标准部分原文

(*注:以下内容并未完全按照原文进行排版,且信息并不完全,也未经过严格校对,所以仅供参考!建议【不要直接作为从业依据】!具体信息还请阅读标准原文PDF。)

热带作物种质资源抗病虫鉴定技术规程橡胶树棒抱霉落叶病

1范围

本标准规定了橡胶树[Hewa brasiliensis (Willd. ex A. Juss. ) Muell. Arg.]棒抱霉落叶病抗病性评

价的术语和定义、病原菌分离鉴定及接种墜寧歯坚史抗病性评价、抗病性评价有效性判定和结 本标准适用于橡胶树棒标落叶病抗病祐晶系硫蚤"

2规范性引用文件

件W注丨丨規的版本适用于本文

1病原菌分离鉴定

从发病植株上选取有典见组薄泠O句叶病病原菌,通过单弛分离 法对分离物进行纯化,经致病宿恥后.警通过形态学墜空/"Trs系统发育学分析确定为多主 棒抱菌,再用多主棒抱毒素的cas2蟲亀s5业型特异引解确定菌株的毒素类型(参见附录B), 分别选择cas2亚型和cas5亚型的强致病力菌株用灭菌的超纯水保存备用。

4.2病原菌菌饼接种体制备

将保存的cas2亚型和cas5亚型多主棒抱病菌接种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基平板上(平板直径 9 cm),(28+l)°C恒温培养7 d,用打孔器取菌落外缘的菌饼(直径5. 0 mm)作为接种体,对照则取同样 大小的空白PDA培养基。

4.3多主棒抱粗毒素提取液制备

3. 1改良培养基

7H2O 0. 5 g,NaCl 0.1 g,CaCl2 ・ 2H2O 0. 13 g,酵母膏 1. 0 g,蒸僭水 1 000 mLo

3.2粗毒素提取液制备

从培养7d的cas2亚型和cas5亚型多主棒弛病原菌菌落边缘打取3个直径5 mm的菌饼,接种于 装有150 mL的改良Fries 3号培养液(培养液的配方见4. 3. 1)中,(25±1)°C恒温箱12 h光暗交替静置 培养12 do将培养的菌液先用2层无菌纱布过滤;滤液于室温5 000 r/min离心10 min;上清液先用 0. 45 Mm的针筒式微孔滤膜过滤器过滤;再用0. 22 Mm针筒式微孔滤膜过滤器过滤,最后一次滤液即为 多主棒弛粗毒素提取液。制备好的粗毒素提取液于4°C冰箱保存备用。

5抗病性鉴定

1病原菌菌饼接种鉴定

1. 1鉴定设计

鉴定时设“IAN873”为抗病对照品系,“ PR107”为感病对照品系。

每个品系选取5片无病斑、完整的橡胶树淡绿期小叶,每片小叶作为1个重复,每个重复设4个接 种点,其中1个接种点为空白对照。

1.2接种

用无菌的牙签在接种点处轻轻刺伤,将病原菌菌饼有菌丝的一面贴于叶片接种点的伤口处,对照则 用空白PDA培养基贴于伤口处,用无菌的滤纸片蘸无菌水贴于菌饼上,叶片按品系贴好标签,置于 (28±1)°C保湿培养。24 h后去除菌饼,继续保湿培养。

5. 1.3数据统计

接种处理3d后进行调查。采用十字交叉法量取发病叶片病斑的直径,单位为厘米(cm),计算每张 小叶和品系平均值。

5.2粗毒素生物萎蔦法鉴定

5. 2. 1鉴定设计

鉴定时设“IAN873”为抗病对照品系,“ PR107”为感病对照品系。

每个品系选取12片橡胶树淡绿期小叶,每2片小叶作为1个重复,其中4个重复用于粗毒素处理, 2个用空白培养基处理做对照。

5.2.2接种

用消毒的手术剪刀将选取叶片的叶柄去除,称重后,迅速转移到含有20 mL粗毒素的50 mL离心 管中,以空白改良Fries 3号培养基作为对照。叶柄端朝下插入粗毒素提取液中,处理的橡胶树叶片置 于(25±1)°C的恒温箱中12 h光暗交替培养。

5. 2.3数据统计

接种处理3d后进行调査。

处理后的叶片用干净的吸水纸吸去叶片表面的液体,称取处理后每张橡胶树叶片的质量,根据处理 后与处理前叶片质量的比值来计算水分损失。

利用式(1)计算处理后的萎薦指数。

WI = Rl ~R, X 100 (1)

式中:

WI——萎蔦指数;

R ——对照叶片处理后与处理前的质量比值;

R ——处理叶片处理后与处理前的质量比值。

(以上是摘录部分标准内容,更多信息还请参考原文PDF)

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