NY/T 3074—2017 牛流行热诊断技术[高清PDF]
标准简介
[NY/T 3074—2017]《牛流行热诊断技术》是于2017-06-12发布的农业行业标准标准,适用于中华人民共和国。标准截图

标准文档说明
标准文档类型为牛流行热诊断技术高清PDF版本(文字版),标准文档内可进行搜索,可以复制原文,可粘贴。标准部分原文
(*注:以下内容并未完全按照原文进行排版,且信息并不完全,也未经过严格校对,所以仅供参考!建议【不要直接作为从业依据】!具体信息还请阅读标准原文PDF。)
1范围
本标准规定了牛流行热的临床诊断和实验室诊断的技术要求。 本标准适用于牛流行热的诊断。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB 19489实验室生物安全通用要求
NY/T 543-2002牛流行热微量中和试验方法
3生物安全措施
进行牛流行热实验室诊断时,如病毒分离、血清处理等,按照GB 19489的规定执行。
4临床诊断
4. 1流行特点
4. 1. 1以3岁〜5岁壮年牛多发,奶牛、黄牛易感性最强。
4. 1.2通过媒介昆虫叮咬呈病毒血症的病牛,再叮咬易感牛传播扩散,多发生于夏末秋初蚊虫活跃的 多雨季节。
4. 1.3呈跳跃式传播,疫区与疫区之间交叉存在无病的清洁区。
4. 1. 4有一定的周期性,间隔时间为1年〜7年不等。
4. 1.5发病率高、死亡率低,在没有继发感染的情况下病牛多为良性经过。
4.2临床症状
4. 2. 1病牛表现为突发高热•体温高达39. 5°C〜42. 5°C,持续2 d〜3 d。
4. 2. 2病牛流泪、畏光,眼结膜充血;有鼻炎性分泌物;口腔发炎、流涎;呼吸急促、困难。
4. 2. 3高热期病牛食欲废绝,反刍停止,瘤胃臓胀、蠕动停止,便秘或腹泻。
4.2.4妊娠母牛可发生流产、死胎。
4.2.5乳牛的产乳量明显降低,甚至停止。
4.3剖检病变
4.3. 1主要病变在肺部,急性死亡的病例可见有明显的肺间质气肿,有些病例可见肺充血与水肿。
4. 3. 2淋巴结充血、肿胀;真胃、小肠和盲肠呈卡他性炎症和渗出性出血。
4.4结果判定
符合4.1流行特点,病牛出现4. 2临床症状和4. 3剖检病变,判为疑似牛流行热。
5实验室诊断
5. 1样品采集与储存
5. 1.2样品的储存
5. 1.2. 1
5. 1.2.2
5. 1.2.3
样品采集后,置于冰上冷藏送至实验室。
2管肝素抗凝血,1管置于4°C冷藏,另外1管冻存于一80°C。
将血清管稍倾斜放于37°C温箱内,保温2 h;然后,3 000 r/min离心10 min。吸取血清,转移
到另外的无菌1. 5 mL离心管中,冻存于一20°C o
5.2器械与设备
组织破碎仪、低温高速离心 养箱、洗瓶或者洗板机、酶标幽 5.3牛流行热病毒分萬与鉴定
5. 3.1试验材料
50 ML容量的彳
A. 1)、牛白细胞提 5.3.2样品处
取出4°C冷藏 菌 pH 7.4 PB 5. 3. 3样品 5. 3. 3. 1 初 5. 3. 3. 1.1 接种1日龄 即可。
5. 3. 3. 1.2
5. 3. 3. 1. 3
-80°Co接种
5. 3. 3.2 传代
5.3.3.2. 1用酒精棉
颅骨。
5. 3. 3. 2. 2用另一把无 管中,在天平上称量所取
5. 3. 3. 2. 3 以 1 : 5(W/V)加K 离心10 min,取上清再接种乳鼠。女 5.3.4观察结果
第1代接种乳鼠在接种后10 d〜12 d死亡,死前无明显症状。第2代接种乳鼠在接种后5 d〜7 d 死亡,死亡前表现后腿麻痹,常倒向一侧。从第3代开始,接种乳鼠在接种后3 d〜5 d有规律地集中死 亡,死前主要表现为神经症状,颤抖,后腿麻痹,步态不稳,常倒向一侧,皮肤痉挛性收缩,多数经1 d〜 2 d死亡。
5. 3. 5病毒鉴定
将盲传至3代〜5代的乳鼠脑组织,按照5. 3. 3. 2的步骤处理,取上清,参照5.4做进一步鉴定。
5. 3.6结果判定
S(见附录A中的
灭菌
,离,1
悬
用。
乳鼠,冻存在
活
y离,暴露出整个
亡乳
组织
〜0. 3
Hz 研磨 1 min, 10 000 r/ min
牛白细
-80 C
、5 min,用微量进样器
、全自动凝胶成像系统、恒温培
,用商
融3次,
重量
H 7. 4
H 7.
乳鼠;及日'
处理。
热循环仪、核酸电泳仪和电
种时,针尖刚
,用0.5 mL灭
清液,脑内 ,接种到脑膜下
5 mL容量的灭菌离心
接种乳鼠出现临床神经症状,并且参照5. 4鉴定结果阳性,判定为牛流行热病毒分离阳性;否则,判
(以上是摘录部分标准内容,更多信息还请参考原文PDF)
网盘链接
百度网盘:https://pan.baidu.com/s/1Ms_xOfa4PdcLjBYTbiROWA
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