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SC/T 7239-2020 三疣梭子蟹肌抱虫病诊断规程[高清PDF]

钱凡旋 4/15/2022 浏览 168 SC/T 7239-2020 国内

标准简介

[SC/T 7239-2020]《三疣梭子蟹肌抱虫病诊断规程》是杰中华人民共和国农业农村部于2020-08-26发布的水产标准标准，适用于中华人民共和国。

标准截图

标准文档说明

标准文档类型为三疣梭子蟹肌抱虫病诊断规程高清PDF版本（文字版），标准文档内可进行搜索，可以复制原文，可粘贴。

标准部分原文

(*注：以下内容并未完全按照原文进行排版，且信息并不完全，也未经过严格校对，所以仅供参考！建议【不要直接作为从业依据】！具体信息还请阅读标准原文PDF。)

三疣梭子蟹肌抱虫病诊断规程
1范围
本标准给出了三疣梭子蟹肌抱虫病(microsporidiosis caused by Ameson portuims)诊断所需试剂和材料、器材和设备、临床症状,规定了三疣梭子蟹肌泡虫病的采样、组织病理学检测、PCR检测和综合判定。
本标准适用于三疣梭子蟹
诊断、检疫和监测。
下列文件对于本文件
凡是不注日期的
GB/T 668
GB/T 286
SC/T 71
下列缩賜 dNTPs：!脱 PBS：磷 EDTA： PCR：聚 Percoll ： Perea Tag：水生栖。 SDS：十二瘗 Tris：三(羟基
合GB/J—2中一级水的规格。
l、EDTA、NaCl、SDS、蛋白酶 K、
RNase AC1OO mg/mL)、苯酚、氯仿、
4.3 PCR检测相关试剂:DNA分子量标准、PBS、Tag DNA聚合酶(5 U/ML).PCR反应缓冲液(10X, 20 mmol/L Mg2*)、dNTPs(2. 5 mmol/L)、上样缓冲液(6X)、电泳缓冲液。
常规 PCR 引物(10 Mmol/L) ：MI1F：TGGCGACCAGTTCTAAG 和 MI545R： AAGCCGAACAATC- CACA；
套式PCR引物(第一轮扩增为常规PCR引物，第二轮扩增为MI230F： CARATAGATAGG GGCAGTAGC 和 MI426R： ATCGGTCACTGCTAGAACTAC) o 4.4组织病理学检测相关试剂：中性树胶、DAFA固定液、苏木精染色液、1%伊红储存液、1%焰红储存液、伊红-焰红染色液、粘片剂.100%乙醇、95%乙醇、85%乙醇、80%乙醇、75%乙醇、50%乙醇。
4. 5组织病理学检测用阳性对照为确诊三疣梭子蟹肌泡虫病且显示明显病理变化的蟹肌肉组织切片；
PCR检测用对照：阳性对照为确诊三疣梭子蟹肌泡虫病的蟹肌肉组织，一80°C保存，阴性对照为经套式
1
PCR检测未感染三疣梭子蟹肌泡虫的健康蟹肌肉组织,-8O°C保存，空白对照为ddH2Oo
4- 6以上配制试剂按附录A的规定执行;引物对应靶基因序列及其扩张片段参见附录B。
5器材和设备
5. 1切片机。
5.2组织脱水机。
5.3包埋机。
5.4染色机。
5.5展片水浴锅。
5.6烘片机。
5.7光学显微镜。
5.8组织破碎仪或研磨机。
5.9 PCR扩增仪。
5. 10高速冷冻离心机。
5. 11纯水仪。
5. 12恒温水浴锅。
5.13生物安全柜。
5. 14电泳仪。
5. 15凝胶成像系统或紫外观察仪。
5.16超微量分光光度计。
6临床症状
三疣梭子蟹肌泡虫病发病蟹摄食量减少，个体消瘦，防御、自洁和摄食等行为受到严重影响，腹面和附肢关节外观失去透明感，剖检可见肌肉白浊、不透明，甚至完全白浊化，参见附录C。
7采样
7.1采样对象
三疣梭子蟹。
7.2采样数量
采样数量应符合SC/T 7103的规定。
7.3采样方法和保存运输
揭开三疣梭子蟹头胸甲，剪取小块肌肉，收集于离心管中。釆集样号的封存和运输应符合SC/T 7103 的规定。
7.4样品釆集
用于组织病理学检测的肌肉样品(VI cm3),用DAFA固定液固定24 h以上，固定液体积是组织体积的10倍以上;用于PCR检测的肌肉样品(50 mg〜100 mg),用95%乙醇保存。
8组织病理学检测
8.1修块
样品固定方法和切片前的取材修整，宜符合GB/T 28630. 4的要求。
8.2脱水
75%乙醇(1 h 45 min)->85%乙醇(1 h 45 min)->85%乙醇(1 h 45 min)—95%乙醇(45 min)->95% 乙醇(45 min)-*无水乙醇(45 min)—无水乙醇(45 min)。

（以上是摘录部分标准内容，更多信息还请参考原文PDF）

网盘链接

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