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SC/T 7235—2020 罗非鱼链球菌病诊断规程[高清PDF]

钱凡旋 4/16/2022 浏览 192 SC/T 7235—2020 全国

标准简介

[SC/T 7235—2020]《罗非鱼链球菌病诊断规程》由9>于2020-08-26发布，适用于全国。

标准截图

标准文档说明

标准文档类型为罗非鱼链球菌病诊断规程高清PDF版本（文字版），标准文档内可进行搜索，可以复制原文，可粘贴。

标准部分原文

(*注：以下内容并未完全按照原文进行排版，且信息并不完全，也未经过严格校对，所以仅供参考！建议【不要直接作为从业依据】！具体信息还请阅读标准原文PDF。)

罗非鱼链球菌病诊断规程
1范围
本标准给出r罗小伯.链球菌病诊断所需试剂和材料、器材和设备、临床症状，规定r采样、细菌分离与纯化培养、生理生化鉴定、PCR检测与综合判定等方法。
下列文件对于本文件的成用是凡是不注日期的引用文御
GB 4789. 9 食曲
GB 4789. 28
SC/T 7014-
SC/T 7201. ■
下列缩略
16S rRN.
BHI：脑 4
bp：碱基灣
CTAB：网
DNA：脱徭
dNTPs：脱
EDTA：乙二
H2O2：过氧彳
P(、R：聚合时询■府m虫
SDS： |二烷基隔・ 7為酶:水生栖热I
Tris：三羟甲基氨基冃
V. P：伏普反应(Voges
1除非另有说明，标准中使用的水为蒸儒水、去离子水或.与其相当纯卒的水。
2 16S rRNA 基因序列扩增引物 27F： 5七AGAGTTTGATCMTG&TCAG 3‘，1492R： 5‘-TACG GYTACCTTGTTACGACTT 3’, 一20笆保存。
4.3
4.4 10XPCR缓冲液，无Mg2'离子，一20°C保存。
5 Tag DNA 聚合前(5 U/ML),-2O°C保存。
6细菌生化鉴定管或生化鉴定卡，商M化试剂。
4. 7脑心浸液肉汤琼脂培养基见附录A中的A. 1。 4.8血琼脂平板见A. 2。
4.9 TE缓冲液（pH 8. 0）见 A. 3。
4. 10 10% SDS 溶液见 A.4。
4. 11 蛋白酶 K（2（） mg/mL）见 A. 5。
4. 12 CI'AB/NaCI 溶液见 A. 6O
13 5OXTAE电泳缓冲液见A. 7O
4- 14 3%过氧化氢（HQ,）溶液见A.8
4- 15半固体琼脂应符合（；B 4789. 28—2013中2. 8的规定。
5器材和设备
1超净工作台。
5.2生物显微镜。
5.3 PCR扩増仪。
5.4电泳仪及水平电泳槽。
5.5凝胶成像仪。
5.6微垃移液器。
5.7涡旋振荡器。
8恒温培养箱。
9离心机。
10微生物检测其他辅助设备和器械应符合SC/T 7201. 1-2006中第4章的要求。
6临床症状
患病罗非鱼缺乏活力，行动缓慢，食欲减退，离群独游于水而,死前出现间断性狂游、翻滚或转圏。患病鱼体色发黑，单侧或双侧眼球突出，眼球充1仇,角膜浑浊，肛门红肿。鲤、盖内侧和下缘、胸鳍基部和体表其他部位冇出血现象。有时急性患病鱼无明显外部症状。解剖可见肝脏淤血，严重时冇坏死灶;脾脏肿大，呈暗红色；胆囊肿大，肠道积水。罗非鱼链球菌病的流行特点参见附录B中的13. 1。
7采样
7.1采样对象
罗非鱼及其变种（参见B.2）。
7.2采样数量
应符合SC/T 7014—2006中6. 1的规定。
7-3个体要求
应符合SC/T 7014-2006中6. 2的规定。
8细菌分离与纯化培养
以无菌操作方式，分别从脑、肾脏、肝脏、脾脏等器官组织中取少量组织划线接种于血琼脂平板（见 A.2）,28笆〜30°C倒置培养24 h〜48 h。待长出菌落后，用无菌接种环挑取单个菌落接种予脑心浸液肉汤培养基平板（见A. l）±,28°C~30°C倒置培养24 h,重复划线至少3次,直至菌落完全纯化。
9生理生化鉴定
9. 1革兰氏染色
应符合SC/T 7014- 2006中9. 3的规定。
待检菌穿刺接种于半固体琼脂,28°C培养48 h 9.3糖类醇类发酵试验
用接种环挑取单个菌落少许，分别接种II.露醇、山梨醇、棉子糖、乳糖、菊糖、水杨甘、海藻糖、蔗糖、葡萄糖、淀粉10种发酵试验管。28°C培养24 h后观察。
9.4七叶昔水解试验
待检菌株接种于七叶甘培养基中（见A. 9）,35°C培养24 h后观察。
反应项H
结果
反应项11
结果
反应项丨丨
结果
运动性
水杨作
d
七叶汁
什露醇
海藻糖
+
过氣化怎駒
+
山梨醇
D-核植
+
CAMP试验
+
棉子糖
蔗糖
+
V. P试验
+
乳糖
d
葡萄糖
+
精氨酸水鮮
+
菊糖
—
淀粉
—
马尿酸水解
+
注：+表示290%侑株为阳性；表示290%俯株为阴性;d表示丨1%〜89%個株为阳性。
9- 10. 3分离菌株在脑心浸液琼脂培养基上28°C〜30°C培养48 h后，形成灰白色、湿润、易乳化的菌落, 菌体革兰氏染色为阳性，生理生化试验结果与表3相符，可初歩判定为海豚链球菌。
注:海豚链球術的生理生化鉴定可采用同等鉴定效果的商品化细菌生化鉴定试剂条。

（以上是摘录部分标准内容，更多信息还请参考原文PDF）

网盘链接

百度网盘：https://pan.baidu.com/s/17u8u2VlBG2MD5YJo4y3mLA
提取码：mhvq

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