SC/T 7201.5-2006 鱼类细菌病检疫技术规范第5部分：白皮假单胞菌白皮病诊断方法[高清PDF]

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标准部分原文

(*注：以下内容并未完全按照原文进行排版，且信息并不完全，也未经过严格校对，所以仅供参考！建议【不要直接作为从业依据】！具体信息还请阅读标准原文PDF。)

1范围

未部分规定了鱼类白皮假单胞菌白皮病(white skin disease)的诊断方法。

本部分适用于鱼类白皮病的诊断。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。

GB/T 4789.28-1994食品卫生微生物检验染色体、培养基和试剂

GB/T 18652—2002致病性嗜水气单胞菌检验方法

SC/T 7014-2006水生动物检疫实验技术规范

SC/T 7201.1—2006

SC/T 7201.2—2006

鱼类细菌病检疫技术规范 第1部分:通用技术

鱼类细菌病检疫技术规范 第2部分:柱状嗜纤维菌烂鲤病诊断方法

3病原体与流行情况

3,1主要病原体

白皮假单胞菌(Pseudomonas dermoalba )。

3.2流行情况

主要危害缝、鱸，草鱼和青鱼有时也可发生，特别是对鱼苗及夏花鱼种危害较大。全国各地都有发 生。水温25C以上为流行季节,当鱼体碰伤或体表被寄生虫损伤时，易发生。

4试剂

除非另有说明，在检验中仅使用确认为分析纯的试剂、蒸馋水或去离子水。常用试剂与染色液的配 制应符合SC/T 7021.1-2006中附录A的规定。微生物生化鉴定管可代替相应的试剂。

4.1七叶灵。

4.2醋酸铅。

4.3氯化汞。

4.4 明胶。 二\：

4.5脱脂奶粉。

4.6可溶性淀粉。

4.7柠檬酸铉铁。

4.8 几丁质。 ''"、具-

4.9酪氨酸。

4.10过氧化氢。

4.12漠麝香草酚蓝。

4.13乙醒。

4.14碘液。

4.15革兰氏染色液。

4.16 kovacs 试剂。

4.17格里斯氏(Griess)试剂。

4.18鞭毛染色剂。

5培养基

胰豚琼脂培养基。

Christensen氏枸椽酸培养基。

硝酸盐液体培养基。

休和利夫森二氏培养基。

明胶培养基(配制见附录A)

5.1-5.4的培养基配制见SC/T 7201.1—2006的附录B。

设备和器械

按SC/T 7201.1—2006第4章的规定执行。

7釆样

遵照SC/T 7014—2006第4章的规定。

8病原菌的分离 8.1平板划线分离

用接种环取被检物在胰豚琼脂培养基平板上划线。可采用各种不同的常规划线方法,需尽量使其 产生单个分散的菌落。在25C恒温培养24 h~96 ho

8.2纯培养

按SC/T 7201.1—2006中7.3的规定执行。

9诊断

9.1临床诊断

9.1.1活动情况

病鱼行动迟缓，病情严重时，头部向下，尾部向上,与水面垂直。

9.1.2外部检查

发病初期，尾柄处发白,以后迅速扩展盖延，背鳍基部后面的体表全部发白。

9.2实验室诊断

9.2.1样品处理

取少量病灶处黏液放在载玻片上，加上2滴〜3滴无菌水,葢上盖玻片,在显微镜下观察;取病灶处 黏液在胰豚琼脂培养基平板上划线分离、培养。

9.2.2镜检

SC/T 7201 巧—2006

20 min,用蒸馋水冲洗，晾干后，加乙液染30 s〜60s,加热，使其稍冒蒸汽而染液不干，冷却后用蒸個水 冲洗。在显微镜下观察。

9.2.3生化检验

9.2.3.1假单胞菌病原性检验

9.2.3.1.1菌落观察

在胰豚琼脂平板上25C培养2 d左右,观察培养基颜色变化。

9.2.3.1.2鞭毛观察

鞭毛染色按GB 4789.28—1994中2.7的规定执行。镜检。

9.2.3.1.3糖发酵实验

将分离菌在休和利夫森二氏培养基管穿刺接种,28C培养24 ho试验管变为黄色，判为阳性。

9.2.3.1.4甘露醇发酵实验

以甘露醇代替休和利夫森二氏培养基中的糖，使甘露醇终浓度为1%,281培养24h。试验管变为 黄色，判为阳性。

9.2.3.1.5氧化醇实验

按GB/T 18652—2002的2.2.2的规定执行。

9.2.3.1.6乙醇氧化实验

以乙醇代替休和利夫森二氏培养基中的糖，使乙醇终浓度为1%,可不加琼脂,28。培养24 h。试 验管变为黄色，判为阳性。

9.2.3.1.7明胶液化实验

将分离菌在明胶培养基管穿刺接种,281培养2 do明胶凝块部分或全部变为可流动的液体，则为 明胶水解阳性。

10结果判定

10.1病原菌

10.1.1临床检验结果符合9.1的规定;菌落不呈黄色;革兰氏染色为阴性;极生鞭毛;氧化酶试验阳 性;葡萄糖发酵试验、乙醇氧化试验、甘露醇试验、明胶水解实验阴性。可判断病原菌为白皮假单胞菌。

10.1.2血清学检验，涂片上有棕色细长颗粒,颗粒大小与杆菌一致，或生化检验符合以下所有特性者 可判定病原菌为柱状噬纤维菌：

菌落形态特征符合9.2的规定，革兰氏染色为阴性；

明胶液化试验、酪素水解试验、硝酸盐还原试验、过氧化氢酶试验、硫化氢试验为阳性；淀粉水解试验、七叶灵水解试验、几丁质分解试验、分解纤维素试验、酪氨酸水解试验、靛基质试验、硫化氢试验、枸橡酸盐利用试验、过氧化氢酶试验、葡萄糖利用产气试验为阴性。

10.2综合判定

临床诊断结果符合9.1的规定，生化稔验符合10.1.1或10.1.2的规定，可判定为白皮病。

（以上是摘录部分标准内容，更多信息还请参考原文PDF）

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