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SC/T 7205.1-2007 牡蛎包纳米虫病诊断规程第1部分：组织印片的细胞学诊断法[高清PDF]

褚冷卉 4/21/2022 浏览 170 SC/T 7205.1-2007 全国

标准简介

[SC/T 7205.1-2007]《牡蛎包纳米虫病诊断规程第1部分：组织印片的细胞学诊断法》是于2007-09-14发布的水产行业标准标准，适用于全国。

标准截图

标准文档说明

标准文档类型为牡蛎包纳米虫病诊断规程第1部分：组织印片的细胞学诊断法高清PDF版本（文字版），标准文档内可进行搜索，可以复制原文，可粘贴。

标准部分原文

(*注：以下内容并未完全按照原文进行排版，且信息并不完全，也未经过严格校对，所以仅供参考！建议【不要直接作为从业依据】！具体信息还请阅读标准原文PDF。)

第1部分：组织印片的细胞学诊断法
1范围
SC/T 7205的本部分规定了牡蛎包纳米虫病组织印片的细胞学诊断法的原理、试剂与材料、仪器设备、操作步骤和结果判定。
本部分适用于现场或基层实验室对患病牡蛎及其他贝类个体进行包纳米虫病的普查和初步诊断。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
斑节对虾杆状病毒病诊断规程第1部分:压片显微镜检査法
斑节对虾杆状病毒病诊断规程第3部分:组织病理学诊断法
3原理 3.1牡蛎包纳米虫及其病理学特征
包纳米虫病是由牡蛎包纳米虫(Bonamia ostreae) 致死包纳米虫(Bonamia exitiosus)和鲁夫来小胞虫(M决海乂。$ mug/iZeM)所引起的。
包纳米虫主要寄生在宿主的血细胞细胞质内,也可在消化道的上皮细胞或间质细胞间游离存在，尤其在坏死的结缔组织中更易发现，有时在鲤和外套膜出现黄的色变和广泛的灰白色小溃疡病灶，但多数受感染的牡蛎外观正常。病灶先在鲤、外套膜和消化腺的结缔组织中出现,血细胞内的包纳米虫随着其数量剧增而很快扩散全身，出现浓密的血细胞浸润,最终导致牡蛎死亡。包纳米虫感染的病理学特征与受感染的宿主种类和数量有关。
包纳米虫病在全年都可能发生，但其患病率和感染强度随季节变暖而增加。这两种包纳米虫的潜伏期长达五个月，用组织学的切片染色法或用细胞学的组织印迹法，在此期间可能检测不到感染。
牡蛎属(OsMea spp.)、鹑螺属(Tiostrea spp.)和巨蛎属(Crassostrea spp・)的所有种可能都是易感宿主。
3.2技术原理
通过光镜观察经吉姆萨氏染液染色后的组织印片，鉴别包纳米虫的形态和数量，从而初步判断被检样品是否感染包纳米虫。
4试剂和材料
4.1除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和恭谣水或去离子水或相当纯度的水。
4.2甲醇。
4.3中性树胶。
4.5吉姆萨氏染液按附录A的规定。
4.6戴维森氏AFA（Davidson'sAFA）固定液按SC/T 7202.3—2007（斑节对虾杆状病毒病诊断规程第3部分:组织病理学诊断法）附录A的规定。
3%戊二醛按SC/T 7205.3-2007（牡蛎包纳米虫病诊断规程第3部分:透射电镜诊断法）附录 A的规定。
1%饿酸按SC/T 7205.3-2007（牡蛎包纳米虫病诊断规程第3部分:透射电镜诊断法）附录A 的规定。
0.22/zm 滤膜 °
4.10吸水纸。
5仪器设备
显微镜:带高倍镜（40X ）和油镜（100x）o 载玻片。
盖玻片。
解剖刀。
镶子。
6操作步骤 6.1印片制作
6.1.1样品的采集按附录B执行。
6.1.2取活体牡蛎的卵巢或心脏组织（心室）在载玻片上印迹，制成涂片,涂片自然干燥后在甲醇中固定5 min~7 min。空气干燥。
6.2染色
6.2.1将干燥的涂片移入吉姆萨氏染液中染色,3张〜4张片子用不同的染色时间染色15 min〜50 min 作试样。
6.2.2
6.2.3
7结果判定 7.1在油镜下放大1000倍,搜索不同的视野进行检査。光镜下包纳米虫大小约2呻〜5呻,在受感染的牡蛎血细胞内外均可见到。虫体细胞质呈嗜碱性，细胞核呈嗜酸性。组织印片法观察到的虫体比用普通组织学染色后观察到的个体要大。
7.2此寄生虫在亲本中主要感染上皮纽织,心脏组织的印片不适用于对亲本的诊断。
7.3诊断结果可疑时,补充组织病理学或透射电鏡诊断法进行结果确认。
附录A（规范性附录）试剂配方
A.1吉姆萨氏染液
0.8g吉姆萨氏染料溶于100 mL由等体积甘油和甲醇组成的混合液中，以机械振荡器振荡2 d~ 3 d,或加入玻璃珠用手间断摇动，共3 d~4 do临用时将4 mL吉姆萨氏贮存液稀释于96 mL的磷酸盐缓冲液中。
A.2磷酸盐缓冲液,pH6.8
0.067 mol/L NazHPOq
0.067 mol/L KH2PO4
A.3 0.067 mol/L Na2HPO4
50 mL
50 mL
Na2HPO4 加水溶解定容至
9.47g
lOOOmL
A.4 0.067 mol/L KH2PO4
KH2PO4
加水溶解定容至
9.08g
1000 mL

（以上是摘录部分标准内容，更多信息还请参考原文PDF）

网盘链接

百度网盘：https://pan.baidu.com/s/1Q6bVCndqvvhrzziy4l5xHQ
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