SC/T 7204.4-2007 对虾桃拉综合征诊断规程 第4部分:指示生物检测法[高清PDF]

标准简介

[SC/T 7204.4-2007]《对虾桃拉综合征诊断规程 第4部分:指示生物检测法》是于2007-06-14发布的水产行业标准标准,适用于全国。

标准截图

对虾桃拉综合征诊断规程第4部分:指示生物检测法
对虾桃拉综合征诊断规程 第4部分:指示生物检测法(截图)

 

标准文档说明

标准文档类型为对虾桃拉综合征诊断规程 第4部分:指示生物检测法高清PDF版本(文字版),标准文档内可进行搜索,可以复制原文,可粘贴。

标准部分原文

(*注:以下内容并未完全按照原文进行排版,且信息并不完全,也未经过严格校对,所以仅供参考!建议【不要直接作为从业依据】!具体信息还请阅读标准原文PDF。)

对虾桃拉综合征诊断规程 第4部分:指示生物检测法

1范围

SC/T 7204的本部分规定了对虾桃拉综合征指示生物检测法的原理试剂与材料、仪器设备、操作步 骤和结果判定。

本部分适用于通过外部症状检査、RT・PCR检测或组织病理诊断査出为桃拉综合征阳性的样品进 行病毒感染活性的检测或对怀疑患桃拉综合征的动物或携带TSV的其它材料进行病毒的感染活性检 测。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。

SC/T 7202.1-2007斑节对虾杆状病毒病诊断规程 第1部分:压片显微镜检查法

SC/T 7202.3-2007斑节对虾杆状病毒病诊断规程 第3部分:组织病理学诊断法

SC/T 7204.2—2007对虾桃拉综合征诊断规程 第2部分:组织病理学诊断法

3原理

桃拉综合征的病原和病理学特征

见SC/T 7204.2—2007(对虾桃拉综合征诊断规程 第2部分:组织病理学诊断法)第3.1条的规

技术原理

以健康活泼或无特定病原的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei )幼虾作为病毒感染的指示生物,采 用经口投喂或注射接种的方法,观察指示生物的发病和死亡情况,并借助组织病理学诊断法对指示生物 进行确诊,从而判定待检样品中TSV的感染能力。

4试剂和材料

4.1除非另有说明,在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和蒸馋水或去离子水或相当纯度的水。

4.2含氯消毒剂:医用消毒剂。

TN缓冲液按附录A的规定执行。

2%无菌盐水按附录A的规定执行。

4.5戴维森氏AFA(Davidson,s AFA)固定液按SC/T 7202.3—2007 (斑节对虾杆状病毒病诊断规程 第3部分:组织病理学诊断法)附录A的规定执行。

4.6人工海水,盐度20~30。

4・7指示虾为健康活泼的凡纳滨对虾(L・vanna瑚)的幼虾,体重1 g〜7 g,经病理检査诊断为未患白 斑病和桃拉综合征,且不存在其他明显病理症状的健康对虾群体。

匀浆器转速达10 000 r/min以上,推荐采用外套固定,内刀旋转的保护性剪切匀浆刀具。 高速冷冻离心机,转速可达12 000 r/min以上,离心温度为41。

超速冷冻离心机,转速可达30 000 r/min以上,离心温度为4X3。

普通冰柜或冰箱,具冷藏箱,并带- 18X3以下冷冻箱体。

超低温冰箱,-8or0

不锈钢切刀。

塑料或木制垫板。

一次性乳胶或塑料手套。

不锈钢药匙。

1.5mL灭菌塑料离心管。

注射器体积10 mLo-

ImL微量注射器。

0.45 /xm除菌滤器。

无菌试管和烧杯等。

水族箱,容积120 L以上,用前经含氯消毒剂在2 000 mg/L有效氯含量消毒30 min,再用自来水

控温仪,控温范围10C〜35C,控温精度土 rc以内。

充气泵。

气石,用前经含氯消毒剂在2 000 mg/L有效氯含量消毒10 min以上。 充气管,用前经含氯消毒剂在2 000 mg/L有效氯含量消毒10 min以上。 虹吸管,用前经含氯消毒剂在2 000 mg/L有效氯含量消毒10 min以上。 表面温度计,用前经含氯消毒剂在2 000 mg/L有效氯含量消毒10 min以上。

6操作步骤

6.1材料物品处理

感染性污染的废水、对虾和其他感染性污染的材料和物品的处理按附录B的规定执行。

6.2样品保存

待诊断样品推荐釆用活体取样方法,死后动物、非敏感宿主或非生物样品在室温下保存不超过6 h、 41保存不超过48 h、- 20C保存数周以内、- 801保存数月或数年以内。

6.3指示虾的暫养

6.3.1每10尾指示虾为1组,暂养在盐度为20-30的消毒海水中,水体100 L-500 L,保持充气,温 度控制在22C〜28P,昼夜温差W2P ,分2次投喂适量配合饲料,每天吸污,并换水1/3〜2/3。

6.3.2指示虾在室内暂养3 d以上,稳定存活后可用于口服投喂或注射接种法感染。

口服法感染

6.4.1 口服法感染适用于较小的指示虾。

6.4.2将10 g〜50 g待测对虾样品切成1 mm~5 mm大小的碎块,按5 g/包分装于小塑料袋中,保存 于-20X:(数周)或- 80t (数月至数年)。

(以上是摘录部分标准内容,更多信息还请参考原文PDF)

网盘链接

百度网盘:https://pan.baidu.com/s/1X6PS_MajDnRx0G-s1_5OfQ
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